到货细胞处理流程与注意事项
收到细胞后的标准处理流程,确保细胞状态良好、顺利进入培养阶段
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运输场景识别
丰晖生物细胞发货分为两种运输方式,收到细胞后请先确认运输类型,再按对应流程操作:
复苏细胞 · 常温运输
T25透气培养瓶,细胞已在瓶中生长
收到后尽快处理冻存细胞 · 干冰运输
冻存管装,细胞处于冻存状态
收到后立即转存01
复苏细胞 · 常温运输
第一步:到货检查
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检查培养瓶是否破损或漏液
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观察培养液是否混浊
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核对细胞名称、数量与发货单
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如有异常,立即拍照联系我们
第二步:消毒静置
- 用 75% 酒精消毒瓶身
- 拆除封口膜
- 置于培养箱中静置 2~4 h💡 透气瓶说明:丰晖发货使用 T25 透气瓶,放入培养箱时无需拧松瓶盖。
💡 关于运输后细胞状态:受运输或气候影响,可能出现细胞密度低、细胞漂浮等现象,均属正常情况。建议静置 2h 后再观察。如仍有细胞未贴壁,可收集上清离心后,将未贴壁细胞重新接种至原瓶或新培养瓶中。
第三步:镜下观察与处理
显微镜下观察细胞状态后,根据细胞类型和细胞密度决定处理方式:
镜下观察确认细胞状态
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密度 < 80%?判断汇合度
→
换液继续培养更换新鲜培养基
密度 > 80%?汇合度较高
→
传代处理1:2 接种至2瓶
贴壁细胞
密度 < 80%:更换预热的 fresh 完全培养基,继续培养。
密度 > 80%:传代至 2 个 T25 瓶或 6 cm 皿内。第一次传代推荐 1:2,后续可根据细胞生长速度及需求自行调整。
悬浮细胞
- 收集 T25 瓶中所有细胞悬液,全部转移至 50 ml 无菌离心管
- 1000 rpm 离心 5 min,弃上清
- 用预热的 fresh 完全培养基重悬细胞,接种至 T25 瓶或 6 cm 皿,补加培养基至 6~8 ml
- 后续根据细胞密度继续培养或传代
⚠️ 注意:发货用培养基不可用来继续培养细胞,收到后需更换为 fresh 预热的完全培养基。
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冻存细胞 · 干冰运输
第一步:到货检查
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检查包装完整性,干冰是否全部升华
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检查冻存管有无破损
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核对冻存管标签信息与发货单
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核实细胞管数是否一致
第二步:处理与转存
- 建议先复苏 1 管,确认细胞状态正常
- 另 1 管放入 -80℃ 冰箱保存过夜,再转入液氮长期保存
- 具体复苏操作参见《细胞培养操作步骤》"细胞复苏"章节
🧊 转存流程:收到冻存管 → 先复苏1管验证 → 其余管 -80℃ 过夜 → 转入液氮长期保存。切勿将冻存管直接放入液氮,建议先在 -80℃ 平衡后再转存。
⚠️ 重要提醒:若复苏后细胞状态异常,请及时与我们联系,我们将协助排查原因并提供售后支持。
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常见问题
Q:收到细胞后发现有细胞漂浮、未贴壁,正常吗?
正常。运输震动可能导致部分细胞脱落漂浮。建议先静置 2h 再观察,如仍有未贴壁细胞,可收集上清离心后重新接种。
Q:培养液变混浊了怎么办?
培养液混浊可能提示细菌污染。请立即拍照留证并联系我们,我们会根据情况安排补发或售后处理。请勿继续使用污染的细胞。
Q:第一次传代用什么比例?
第一次传代推荐 1:2,即 1 瓶传为 2 瓶。后续可根据细胞生长速度和实验需求自行调整传代比例和频率。
Q:冻存细胞收到后可以直接全部放液氮吗?
建议先复苏 1 管确认状态。其余管先在 -80℃ 过夜,再转入液氮长期保存,避免因运输导致的问题全部发现不了。
Q:发货的培养基能继续用吗?
不建议。发货用培养基在运输过程中可能受到环境影响,收到后应更换为 fresh 预热的完全培养基。




