Transwell 趋化迁移实验，定量评价细胞定向运动能力，无需基质胶包被，适合药物筛选与转移潜能研究
细胞迁移（cell migration）是指细胞在化学信号或其他刺激下发生的定向或随机运动，是胚胎发育、伤口愈合、免疫应答等生理过程的基础，也是肿瘤侵袭转移的必要前提。体外评价细胞迁移能力的经典模型是 Transwell（Boyden 小室）迁移实验。
Transwell 迁移实验通过在上、下两个腔室之间建立趋化因子浓度梯度，诱导上室细胞穿过微孔聚碳酸酯膜迁移至下室，计数穿膜细胞即可量化细胞的迁移能力。
丰晖生物提供一站式细胞迁移检测服务：从细胞铺板、梯度建立、穿膜培养到染色计数与统计分析全程标准化操作，原始图片与完整报告同步交付。
核心应用场景：
提示：若想评价细胞降解细胞外基质并穿透屏障的能力，应选择细胞侵袭实验（膜面需预先包被 Matrigel 基质胶）；若只想评价趋化性定向运动能力，Transwell 迁移实验更合适。两者可组合委托。
Transwell 小室由上下两室构成，中间以带微孔的聚碳酸酯膜（常规孔径 8 μm）分隔。将细胞接种于上室，趋化因子（或含血清培养基）加至下室，形成由下室向上室递减的浓度梯度。细胞在趋化信号引导下发生定向迁移，穿过膜孔附着于膜的下表面；经固定、染色后，在显微镜下计数穿膜细胞数量即可量化迁移能力。
图1 Transwell 细胞迁移实验原理示意图
常规迁移 / 侵袭实验多选用 8 μm 孔径，便于大多数贴壁细胞（肿瘤细胞、内皮细胞等）变形穿过。对于体积较小的细胞或淋巴细胞，可视情况选用 3 μm 或 5 μm 孔径。孔径过大会导致细胞直接掉落，过小则穿膜效率过低。
细胞向趋化因子浓度升高的方向（下室）迁移。因此下室需加入足量趋化剂（常用含 10% FBS 的完全培养基，或特定趋化因子如 CXCL12/SDF-1、EGF 等），上室保持低浓度或无血清体系，形成稳定的正向梯度。
梯度不稳定或无梯度时，细胞仅表现为随机运动，即便有穿膜也不能代表迁移能力。这是 Transwell 实验中最常见的失败原因。
操作简便、背景干净、成像清晰，适合大批量初筛与实验条件优化
上下室体系相互独立，可研究趋化因子对细胞迁移的直接影响，是趋化性研究的标准模型
耗材成本低，适合多样本平行实验与浓度梯度筛选
染色计数穿膜细胞，数据客观，便于组间统计学比较
同一体系更换为 Matrigel 包被膜即可开展侵袭实验，便于组合委托、统一出报告
选用对数生长期、状态良好的细胞；迁移实验前按需进行无血清饥饿处理，排除增殖干扰
下室加入含趋化剂的培养基，上室接种规定数量的细胞悬液，放置小室时注意避免产生气泡
37 ℃ 培养适当时间（常用 12–24 h），时长需预实验确定，避免穿膜过多或过少
棉签擦除上室面未迁移细胞，甲醇固定后进行结晶紫染色并充分清洗
显微镜下随机选取视野拍照计数穿膜细胞，或染色洗脱后测定 OD 值，完成组间统计分析
下表为本项服务的常规工作环节与说明。样品状态、数量与实验方案确认后，我们会给出明确的时间安排。
| 服务内容 | 工作说明 |
|---|---|
| 细胞准备与预实验 | 含接种密度与迁移时间摸索 |
| 小室接种与迁移培养 | 培养时长依细胞类型与预实验结果确定 |
| 固定染色与成像计数 | 每孔随机多视野采集 |
| 数据分析与报告出具 | 计数统计与图表输出 |
| 交付内容 | 说明 |
|---|---|
| 原始显微图片 | 每孔随机多视野原始照片（含物镜倍数与标尺） |
| 穿膜细胞计数数据 | 逐视野计数的原始记录与组内均值、标准差 |
| 统计与图表 | 组间比较、统计学检验结果与柱状图 |
| 完整实验报告 | 实验步骤、耗材与试剂信息、培养时间与分组方案 |
以下为细胞迁移实验的典型结果示例。
图一 细胞迁移实验结果示例（结晶紫染色）
结果呈现说明：穿膜细胞经结晶紫染色呈紫色，随机视野计数后以每组平均穿膜细胞数表示迁移能力；处理组与对照组的差异通过统计学检验判定，报告同时提供原始计数数据与统计图。
Transwell 迁移实验的操作细节对结果影响很大，以下要点直接决定实验能否成立：
方法特点：① 可构建稳定趋化梯度，模拟体内细胞定向迁移过程，无物理划伤、应激干扰小；② 结果可定量分析，数据客观，便于组间统计学比较；③ 实验体系灵活通用，更换为 Matrigel 包被膜即可开展侵袭实验；④ 上下腔体系相互独立，便于设置单一变量，区分趋化性迁移与细胞随机运动。
不需要。迁移实验直接在裸膜上进行；若需评价细胞降解细胞外基质并穿透屏障的能力，应选择侵袭实验（膜面需包被 Matrigel 基质胶）。
细胞朝趋化因子浓度较高的一侧（下室）迁移。因此下室需加入含血清培养基或特定趋化因子，上室保持低浓度或无血清，形成由下室向上室递减的正向梯度。
需通过预实验确定。时间过短穿膜细胞太少、统计误差大；时间过长细胞穿膜过多甚至脱落，无法体现组间差异。常见范围为 12–24 h，不同细胞差异较大。
通过接种前无血清饥饿处理，并使用无血清上室体系抑制细胞增殖；同时可配合细胞增殖实验（CCK-8/EdU）交叉验证，排除增殖因素干扰。
常用两种：① 显微视野直接计数（随机多视野拍照后计数，推荐，可同时观察细胞形态）；② 结晶紫染色洗脱后测 OD 值（适合高通量初筛，但无法观察形态）。
具体周期需结合细胞类型，以及是否需要通过预实验摸索接种密度与迁移时间来评估。若您已提供成熟的实验条件与最优参数，安排可明显提前。方案确认时我们会给出明确的时间安排。
细胞迁移常与侵袭、增殖等表型联合评价。以下服务可组合开展，统一送样、同步出报告：
service@fenghbio.com
长沙市岳麓区麓云路100号
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