细胞侵袭

细胞侵袭（cell invasion）是指细胞分泌蛋白酶降解细胞外基质（extracellular matrix，ECM）并穿越基质屏障的主动过程，是肿瘤转移级联反应中的关键步骤。与仅评价运动能力的迁移实验不同，侵袭实验同时考察基质降解能力与运动能力。

Transwell 侵袭实验在微孔聚碳酸酯膜上预包被一层 Matrigel 基质胶模拟体内 ECM 环境。细胞必须先分泌基质金属蛋白酶（MMPs）等水解酶降解基质胶，才能穿透膜孔到达下室；计数穿膜细胞即可反映细胞的侵袭能力。

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Transwell 侵袭实验的体系与迁移实验一致，区别在于微孔膜上表面预包被一层 Matrigel 基质胶。Matrigel 是从 EHS 小鼠肉瘤中提取的基底膜基质，主要成分为层粘连蛋白、IV 型胶原、巢蛋白与硫酸肝素蛋白多糖，在 37 ℃ 下可自组装成凝胶，模拟体内基底膜与 ECM 屏障。

细胞需分泌基质金属蛋白酶（MMPs）等水解酶降解基质胶，并通过细胞变形运动穿过膜孔迁移至膜下表面。计数进入下室的细胞量即可反映细胞的侵袭能力强弱。

图1 Transwell 细胞侵袭实验原理示意图

为什么侵袭实验必须包被基质胶？

不包被基质胶时，细胞只需穿过膜孔即可到达下室，反映的是运动能力；包被基质胶后，细胞必须先完成基质降解这一限速步骤才能穿膜，反映的是侵袭能力。两者机制不同，不能相互替代。

基质胶浓度与厚度直接影响结果

基质胶浓度过高或涂层过厚会显著降低穿膜率，可能导致各组均无细胞穿透而无法比较；浓度过低则屏障作用不足，结果接近迁移实验。通常先以 200–300 μg/mL 浓度开展预实验，再根据细胞的侵袭能力调整。

MMPs 与侵袭能力的关联

基质金属蛋白酶（尤其是 MMP-2、MMP-9）是细胞降解基底膜的关键酶。若研究涉及 MMP 抑制剂或 MMP 表达调控，侵袭实验是直接的体外功能验证模型。

下表为本项服务的常规工作环节与说明。样品状态、数量与实验方案确认后，我们会给出明确的时间安排。

以下为细胞侵袭实验的典型结果示例。

侵袭常与迁移、增殖等表型联合评价。以下服务可组合开展，统一送样、同步出报告：