多种化学修饰与 HPLC 纯化可选，退火合成双链 siRNA，保证序列正确
siRNA（小干扰 RNA）是机体或细胞实现基因沉默最为简捷的方法之一，成本低、转染效率高，也是 RNAi 临床治疗的重要方向，在药物开发方面具有不可替代的优势。
化学合成的 siRNA 进入细胞质后直接组装入 RISC 复合体，无需载体转录与酶切加工，起效快、干扰时间可控，适合瞬时干扰实验与序列快速筛选。
丰晖生物提供一站式 siRNA 合成服务：可按提供的靶序列合成，也可协助设计序列；支持多种化学修饰与 HPLC 纯化，原始数据与完整质检报告同步交付。
核心应用场景：
提示：按客户提供的序列合成，保证合成序列 100% 正确，但不保证序列的干扰效果；若对干扰效率有要求，可选择三保一套餐，或先进行序列筛选。
siRNA 进入细胞质后会组装形成 RISC 复合物；复合物中热力学稳定性较弱的正义链随即降解去除，仅反义链留存于 RISC 内。
当反义链特异性结合互补靶 mRNA 时，RISC 复合物锚定靶标，其内部 AGO2 蛋白对靶 mRNA 进行剪切，断裂后的 mRNA 被胞内核酸酶快速降解。
整个过程中 siRNA 反义链不会损耗，完成切割后可随 RISC 解离，持续识别并降解多条靶 mRNA，实现高效持续的基因沉默。
图1 siRNA 组装 RISC 介导靶 mRNA 降解示意图
支持 2 OD 起订与大批量定制，可按实验规模灵活选择
可选 FAM、Cy3 等荧光标记及多种化学修饰，适配不同研究需求
常规采用 HPLC 纯化，纯度与批次稳定性有保障
提供合成报告与质检数据，序列正确性有据可查
针对靶基因不同区域设计三条 siRNA，提高命中高效序列的概率
确认靶序列或协助设计 siRNA 序列，评估特异性与脱靶风险
按选定序列进行固相合成，按需引入荧光标记或化学修饰
对合成产物进行 HPLC 纯化，去除不全合成片段
正义链与反义链退火形成双链，进行纯度与序列质检
按规格分装并出具合成报告与质检数据
下表为本项服务的常规工作环节与说明。序列与规格确认后，我们会给出明确的时间安排。
| 服务内容 | 工作说明 |
|---|---|
| 序列确认与设计 | 确认客户提供序列或协助设计，评估序列特异性 |
| 合成与修饰 | 固相合成 siRNA，按需引入 FAM、Cy3 等标记 |
| HPLC 纯化 | 纯化产物并检测纯度，保证批次稳定 |
| 退火、分装与交付 | 双链退火、定量分装并出具质检报告 |
siRNA 默认提供退火后的双链，3' 末端有两个悬垂的 dT；默认规格为 2 OD，三保一套餐另含阳性、阴性及荧光对照。
| 交付内容 | 说明 |
|---|---|
| 常规 siRNA | 默认 2 OD，HPLC 纯化，退火双链 |
| 修饰 siRNA | 默认 2 OD，可按需引入 FAM、Cy3 等化学修饰 |
| siRNA 三保一 | 靶基因 siRNA 2 OD×3，另含对照产品 |
| 对照与标记产品 | 阳性对照、阴性对照与 FAM 荧光对照各 0.5 OD |
| 质检文件 | 合成报告与 HPLC 纯度数据，序列正确性可追溯 |
以下为 U2OS 细胞 ENO2 基因 siRNA 干扰的典型结果示例。
图一 U2OS 细胞中 ENO2 基因 siRNA 干扰效果
结果呈现说明：siRNA 干扰效果通常以 qPCR 检测 mRNA 水平，或以 Western blot 检测蛋白水平进行评价。报告提供相对表达量数据与复孔统计结果。
siRNA 为化学合成的双链 RNA，进入细胞后直接组装 RISC 发挥作用，起效快、持续时间短，适合瞬时干扰；shRNA 由载体在细胞内转录生成，可长期稳定表达，适合稳株构建与长期沉默研究。
可以。按客户提供的序列合成，保证合成序列 100% 正确，但不保证序列的干扰效果；如需保证效率，建议选择三保一套餐或先进行序列筛选。
三保一针对靶基因不同区域设计三对 siRNA，在转染效率 ≥90% 的条件下，保证 RNA 水平至少有一对可将靶基因敲降至 70%~50%；若目的基因本底表达非常低，则无法保证干扰效率。
常规、修饰及三保一 siRNA 默认规格为 2 OD，纯化方式为 HPLC；三保一套餐另含阳性对照、阴性对照与 FAM 荧光对照各 0.5 OD。
可以。支持 FAM、Cy3 等荧光标记及多种化学修饰，具体修饰类型与位置可在下单时与技术人员确认。
默认合成的 siRNA 仅适用于体外细胞实验；动物实验需选择经稳定化学修饰的 RNA 产品，可另行沟通方案。
具体周期视序列、修饰类型与纯化方式而定，确认订单信息后我们会给出明确的时间安排。
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