Immunomagnetic Cell Separation

磁珠分选

免疫磁珠标记 + 磁场分离,快速获得高纯度目标细胞,支持管式与柱式两种分离方案

免疫磁珠
目标细胞纯化
高纯度回收
管式 / 柱式

磁珠分选(immunomagnetic cell separation)是一种基于磁性微粒(磁珠)与目标物质特异性结合、通过外加磁场对目标物质进行快速分离与纯化的实验技术。在细胞生物学与临床研究中,磁珠分选已成为高质量细胞分选的标准方法。

丰晖生物提供一站式磁珠分选服务,可分离特定细胞亚群以及蛋白质、核酸等目标物,支持管式与柱式两种分离方案,并提供正选与负选策略建议;分选后以流式细胞术评估纯度与回收率,原始数据与完整报告同步交付。

核心应用场景:

  • 免疫细胞亚群分离 — T 细胞、B 细胞、NK 细胞、单核细胞、巨噬细胞等分选
  • 干细胞与祖细胞纯化 — 从混合细胞群中富集目标干性细胞
  • 分子分离纯化 — DNA、RNA、蛋白质等生物分子的分离
  • 免疫分析前处理 — 为 ELISA 等免疫分析提供纯化样本
  • 单细胞组学前处理 — 为下游单细胞测序提供高纯度细胞

正选还是负选?

  • 正选(positive selection) — 磁珠直接标记目标细胞,纯度最高,但磁珠可能影响细胞后续培养或功能实验
  • 负选(negative selection) — 标记并去除非目标细胞,目标细胞未被标记、状态更“干净”,更适合功能性实验

我们会根据您的下游实验目的推荐合适策略。

磁珠分选利用磁性微珠与目标物质(如细胞表面的特定抗原)之间的特异性结合,在外加磁场作用下实现目标物质的分离与纯化。磁珠通常由铁氧化物(如 Fe₃O₄)或其他磁性材料制成,表面修饰有特定的识别分子(如抗体、亲和配体等),以增强与目标物质的亲和力。

根据分离载体的不同,磁珠分选可分为基于管与基于柱两类方法。

基于管(tube-based)的磁性分离法

将磁性标记细胞的悬液置于磁铁中,标记细胞在磁场作用下迁移并吸附于管壁一侧,随后吸弃上清即完成分离。优点是操作简便、无需专用设备;缺点是纯度与回收率相对较低,适合对纯度要求不极端的快速分离。

基于柱(column-based)的磁性分离法

将磁性标记细胞的悬液通过置于磁铁内的分离柱,分离柱内的磁场捕获标记细胞,未标记细胞则随液体流出。优点是纯度与回收率更高、可处理较大细胞量;缺点是需配套分离柱与磁力架,成本较高、步骤相对繁琐。

为什么必须评估分选效率?

分选后的纯度(目标细胞占分选后总细胞的比例)与回收率(分选所得目标细胞数占分选前目标细胞总数的比例)是评价分选效果的两个核心指标,需通过流式细胞术检测。

需要注意的是,纯度与回收率往往此消彼长:追求极高纯度可能需要牺牲回收率。我们会在报告中标明两项指标,便于您判断是否满足下游实验要求。

🎯

特异性强

基于抗原抗体的高度特异性识别,可有效区分目标物与非目标物,减少交叉反应干扰

🔬

灵敏度高

磁珠的富集作用可显著提高检测下限,对痕量目标物的分离具有独特优势

⚡

操作简便快捷

分离过程可在较短时间内完成,无需复杂仪器设备与专业技术培训

📊

适用范围广

可应用于细胞、细菌、病毒、蛋白质、核酸等多种类型目标物的分离与纯化

🧪

分选效果可评估

分选后以流式细胞术检测纯度与回收率,数据可量化、可追溯

1

样本准备与计数

制备单细胞悬液(或目标物溶液),过滤去除细胞团块,准确计数并确认活力

2

磁珠标记

加入特异性磁珠孵育,使磁珠与目标物(如细胞表面抗原)充分结合

3

洗涤去游离磁珠

洗涤去除未结合的游离磁珠,减少非特异性吸附与背景干扰

4

磁场分离

将标记后样本置于磁场中(管式)或通过分离柱(柱式),分离目标物与非目标物

5

纯度评估与交付

以流式细胞术检测纯度与回收率,出具完整实验报告

下表为本项服务的常规工作环节与说明。样品状态、数量与实验方案确认后,我们会给出明确的时间安排。

服务内容工作说明
样本接收与准备含细胞计数与活力检测
磁珠标记与孵育含孵育条件优化
洗涤与磁场分离管式或柱式方案
纯度检测与报告出具流式评估纯度、回收率与活率

若需在分选后直接衔接培养、增殖或功能实验,可在委托时一并规划,避免样本反复冻融。

交付内容说明
分选后目标细胞(或目标物)按要求提供活细胞悬液(可含培养基)或目标分子样本
流式纯度检测原始数据分选前后的流式原始数据(FCS),展示目标细胞群体的富集效果
纯度与回收率数据分选后纯度、回收率与细胞活率等关键指标,含检测原始数据
完整实验报告实验步骤、磁珠品牌与货号、分选方案(正选 / 负选、管式 / 柱式)与检测结果

以下为磁珠分选纯度检测的典型结果示例。

图一 磁珠分选纯度检测结果示例

结果呈现说明:分选效果以流式检测的纯度与回收率呈现。报告同时提供分选前后的流式散点图对比,直观展示目标细胞群体的富集效果与纯度提升幅度。

1
磁珠质量是基础 — 选择质量可靠的免疫磁珠产品,关注磁珠粒径均一性、抗体偶联效率与磁响应强度等指标。
2
严格控制操作条件 — 孵育温度、时间与缓冲液 pH 需严格按说明控制,避免极端条件影响抗原抗体结合;全程使用合适的缓冲液配方可减少非特异性吸附。
3
降低非特异性吸附 — 通过添加封闭剂(如 BSA、FBS)、优化洗涤条件与调整缓冲液配方,减少杂质带来的干扰。
4
关注细胞活性 — 分选过程(尤其柱式分选)可能影响细胞活性,分选后需检测细胞活率;若下游为功能实验,建议优先考虑负选策略。
5
必须评估分选效率 — 通过流式细胞术检测分选后目的细胞的纯度与回收率,避免进入下游实验后才发现纯度不足。
6
保证样本新鲜度 — 细胞样本应尽量新鲜处理,避免长时间放置导致表面抗原降解或细胞凋亡,影响分选效果。

Q应该选择正选还是负选?

正选直接用磁珠标记目标细胞,纯度最高,但磁珠可能影响细胞后续培养与功能实验;负选通过去除其他细胞获得目标细胞,目标细胞未被标记、状态更好,更适合功能性实验。我们会根据您的下游实验目的推荐合适策略。

Q分选的纯度能达到多少?

纯度取决于目标抗原的表达水平、磁珠质量与分选方案。管式分选通常可实现较高纯度,柱式分选配合优化方案纯度更高。具体数值以实际流式检测结果为准,我们不做脱离实验的承诺。

Q需要提供多少细胞?

所需细胞量取决于目标细胞在样本中的比例。一般建议起始样本中目标细胞数量不低于 1×10⁶,具体请与我们确认。细胞量越充足,纯度与回收率越有保障。

Q管式和柱式怎么选?

管式操作简便、无需专用设备,适合快速分离与中等纯度需求;柱式纯度与回收率更高,适合对纯度要求严格或细胞量较大的实验。我们会根据您的实验目的给出建议。

Q分选后的细胞可以直接培养吗?

可以。但正选后细胞表面带有磁珠,可能对部分功能实验有影响,建议在实验设计阶段明确下游用途;若以功能实验为目的,优先考虑负选方案。

Q检测周期多长?

具体周期包含分选与流式纯度评估;样本类型特殊或需要条件优化时,安排会相应放宽。方案确认时我们会给出明确的时间安排。

需要磁珠分选服务?

告知目标细胞标志物与起始样本量,我们确定分选策略,交付目标细胞与纯度、回收率验证数据

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