FTLipo 转染试剂

活动价:

¥1080.00

市场价:¥1280.00

一键复制产品信息
产品规格:
  • 1ml
货号:

FHL0520

  • 产品信息
  • 注意事项
  • 实验验证
  • 产品声明
  • 引用文献
  • 相关产品
  • 文件下载
  • 产品简介

    FTLipo™转染试剂(FTLipo™ Transfection Reagent)是一种高效脂质体转染试剂,适用于质粒、核酸或核酸蛋白复合物的转染,对于大多数真核细胞都有很高的转染效率。FTLipo™转染试剂对细胞无明显毒性,贴壁和悬浮细胞均可使用。

  • 产品名称

    FTLipo™转染试剂(FTLipo™ Transfection Reagent)

  • 产品货号

    FHL0520

  • 规格

    1mL

  • 保存条件

    4℃保存,1年有效

使用说明

注:以下操作均以六孔板的用量为例,其他培养板或培养皿的质粒、试剂用量见附表。

  1. 细胞培养:转染前一天,将细胞以0.5~1×106个/孔铺到六孔板内,使第二天细胞的汇合度能达到50%~70%。(其他培养容器的细胞接种量以六孔板为参照换算)
  2. 转染操作前,将六孔板内的培养基更换成2ml/孔的基础培养基(也可使用完全培养基,但建议不加抗生素)。
  3. 使用前将FTLipo™轻轻混匀,取一只1.5ml的无菌离心管,加入10μl FTLipo™,再加入250μl的基础培养基,用枪轻轻吹打混匀,室温孵育5分钟。
  4. 另取一只1.5ml的无菌离心管,加入4μg质粒DNA到250μl基础培养基中,用枪轻轻吹打混匀。
  5. 将步骤3和步骤4的质粒DNA溶液和FTLipo™溶液轻轻吹打混匀。
  6. 室温下孵育20分钟。(若出现絮状沉淀属于正常现象,不会影响转染效率。)
  7. 将500μl FTLipo™-DNA混合物均匀滴加到六孔板的一个孔中,随后轻轻摇摆孔板混匀。
  8. 将孔板置于细胞培养箱培养6小时后,将FTLipo™-DNA-培养基混合液更换为2ml/孔的新鲜培养基继续培养。
  9. 细胞转染后24~48小时可检测转染效果,如果转染的质粒带有荧光表达标签,可通过荧光显微镜观察转染效率。若是转染后的细胞需要筛选稳定表达株,可在转染后24小时加入筛选药物如G418、嘌呤霉素等。
附表:不同培养板/皿中FTLipo™、DNA、培养基用量表
96孔板
底面积:0.3 cm2
细胞培养基体积:100 μl
溶剂培养基体积:2×25μl
质粒DNA:0.2 μg
FTLipo™:0.2~0.5μl
48孔板
底面积:0.8 cm2
细胞培养基体积:350 μl
溶剂培养基体积:2×37.5μl
质粒DNA:0.5 μg
FTLipo™:0.5~1.25μl
24孔板
底面积:2 cm2
细胞培养基体积:500 μl
溶剂培养基体积:2×50μl
质粒DNA:0.8 μg
FTLipo™:0.8~2μl
12孔板
底面积:4 cm2
细胞培养基体积:1 ml
溶剂培养基体积:2×100μl
质粒DNA:1.6 μg
FTLipo™:1.6~4μl
6孔板
底面积:10 cm2
细胞培养基体积:2 ml
溶剂培养基体积:2×250μl
质粒DNA:4.0 μg
FTLipo™:4~10μl
6cm皿
底面积:20 cm2
细胞培养基体积:4 ml
溶剂培养基体积:2×0.5ml
质粒DNA:8.0 μg
FTLipo™:8~20μl
10cm皿
底面积:60 cm2
细胞培养基体积:12 ml
溶剂培养基体积:2×1ml
质粒DNA:24 μg
FTLipo™:24~60μl

注:由于不同的细胞自身特性、培养条件、转染参数等可能影响转染效果,因此我们提供了一个范围值可供转染体系优化。

转染效果


FTLipo™转染293T细胞效果图(明场与荧光对比,100×):上排ZsGreen1绿色荧光,下排mCherry红色荧光,转染效率均超过90%。

注意事项

  • 细胞转染操作需在超净工作台内进行,全程需佩戴好无菌帽、口罩和手套;
  • 细胞转染用的质粒需使用无内毒素,A260/A280≈1.8的高纯度质粒DNA,丰晖生物出售的细胞转染级质粒可以满足细胞转染实验要求;
  • 转染用的目的细胞需状态良好,否则转染效率会受到较大的影响;
  • 细胞转染用的培养基可以使用细胞本身对应的基础培养基,也可使用Opti-MEM(减血清培养基);
  • FTLipo™请勿反复冻融或长时间暴露于空气中,否则会影响转染效率;
  • FTLipo™在混匀时请勿vortex或离心。

产品声明

1. 本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗。

2. 产品使用前请仔细阅读产品说明书,按照规定的条件储存和操作。

3. 实验过程中请做好个人防护,避免直接接触。

4. 产品质量问题请在收到货后7个工作日内反馈。